新闻资讯 茶油品牌 供应商 营销展会 代理加盟 茶油收购
首页> 茶油价格> 详情

急,明天考试要用的,用离子沉淀法提取茶叶中的茶多酚详细步骤

绿色山茶油 2021-05-17 21:28 编辑:niming 8421阅读

1. 浸提 称取一定重量过20目的茶叶末,加入其重量15-25倍的60℃-80℃的热水,搅拌下恒温浸提20min-30min,过滤得到茶叶浸提液。即: 以料液比:1/15、1/20、1/25,提取温度:60℃、70℃、80℃,提取时间:20min、25min、30min为3因子3水平进行正交实验,然后对实验结果进行极差分析,选出最优组合,做验证性实验,如若符合最佳结果,进行下面的实验 1(料液比) 2(提取温度) 3(提取时间) 因素1 1:15 60℃ 20min 因素2 1:20 70℃ 25min 因素3 1:25 80℃ 30min 测浸提液体积,并取样分析浸提液中茶多酚的含量,计算浸提液中茶多酚的总量、茶多酚的浸提率。

2.盐析 加氯化钠于茶叶浸提液中,质量分数为2-6%,静置0.5-1.5h后过滤(可用抽滤或者离心的方式)。

3.沉淀 在上述滤液中加入茶叶重量2%-5%的亚硫酸氢钠,然后加入茶叶重量15%-25%的硫酸铝饱和溶液,加热至上述最优组合温度,用10%-20%的碳酸氢钠溶液在快速搅拌下调节pH至5-6,此时有大量沉淀析出,沉淀自然沉降一段时间后过滤,最后用等体积最有温度热水洗涤沉淀三次。

4.酸溶 将沉淀在快速搅拌下放入到茶叶重量1-3倍的pH=2.5-4.5的盐酸水溶液溶解沉淀,控制酸转溶液的pH=2.5-4.5,酸转时间10min-50min,少量胶状沉淀经离心分离出去。即: 以酸浓度:pH=2.5,pH=3.5,pH=4.5,料酸比:1:1,1:2,1:3,酸转时间:10min,30min,50min为3因子3水平进行正交实验,在最优条件下测酸转溶液体积然后对实验结果进行极差分析,选出最优组合。 1(酸浓度) 2(料酸比) 3(酸转时间) 因素1 pH=2.5 1:1 10min 因素2 pH=3.5 1:2 30min 因素3 pH=4.5 1:3 50min 测酸转溶液体积并取样分析计算酸转溶液中茶多酚的含量和总量,计算茶多酚经过盐析、沉淀及酸溶后的回收率。

5.萃取 加入茶叶重量2%-5%的NaHSO3至酸转溶液中,然后用体积0.3-1.5倍的乙酸乙酯萃取1-5次,每次萃取时间2-10min,合并萃取液。 测萃余相体积,并取样分析计算萃余相中茶多酚的总量,计算茶多酚的萃取率。

6.洗涤 加入茶叶重量1-3%的维生素C至萃取液体积0.4倍的水中,用柠檬酸调节水溶液的pH=2.5-3.0,等分成2份对乙酸乙酯萃取液洗涤两次。

7.蒸发浓缩 将洗涤后的乙酸乙酯相在50~70℃下真空蒸发回收乙酸乙酯,待浓缩成膏状物时,加入膏状物2倍体积的无水乙醇洗涤挂在壁上的物料,继续浓缩成稠的膏状物。 计算其中茶多酚的含量。 提取过程中茶多酚的分析测定方法(定量) 准确吸取待测溶液1ml,将其稀释1~25倍(稀释成15倍),再从稀释液中准确吸取1ml,注入25ml的容量瓶中,加水4ml和酒石酸亚铁溶液5ml,充分混合,再加pH=7.5的磷酸盐缓冲溶液至刻度,用1cm比色杯,在波长540nm处,以试剂空白液作参比,测定吸光度。 计算公式: 茶多酚(g/ml)=1.957AX/500 A:吸光度 X:稀释倍数。 1)酒石酸亚铁溶液 1g硫酸亚铁和5g酒石酸钾钠用水溶解并定容至至1L,放置过夜后使用。 2)pH=7.5的磷酸二氢钾缓冲液 A液:称取磷酸氢二纳23.877g,溶解并定容至至1L; B液:称取经110度烘干2h的磷酸二氢钾9.078g,加水溶解并定容至至1L A液85ml和B液15ml混匀即可。

感觉不错,赞哦! (0)
下次努力,加油! (0)
标签说明:
网友评论仅供其表达个人看法,并不表明本站立场。
评论
相关阅读