具体内容到农业部网站上2015年水南街道动e78988e69d物疫病强制免疫计划 一、总体要求 对高致病性禽流感、口蹄疫、高致病性猪蓝耳病、猪瘟等4种动物疫病实行强制免疫，群体免疫密度常年维持在90%以上，其中应免畜禽免疫密度要达到100%，免疫抗体合格率全年保持在70%以上。二、职责分工各村居对辖区内动物防疫工作负总责，组织有关部门按照职责分工，落实强制免疫计划，保证免疫密度。各村居具体组织实施强制免疫计划，落实动物强制免疫质量提升行动计划，街道制定并执行本辖区强制免疫计划实施方案，负责强制免疫动物疫病疫苗的供应、保存和使用监管。饲养动物的单位和个人应当依法履行强制免疫义务，按照兽医主管部门的要求做好免疫工作。对规模养殖的动物实施程序化免疫，对散养的动物实施集中免疫和定期补免。三、组织实施（一）加强组织部署，确保免疫密度。各村居要按照本计划要求，结合本地实际，及时落实强制免疫计划实施方案，认真组织部署强制免疫工作。继续坚持散养畜禽实行集中免疫和“月免疫日”相结合，规模养殖场按程序规范免疫的做法，确保免疫全覆盖。（二）加强业务培训，提升免疫质量。各村居要按照“逐级负责，分级培训”的原则开展动物防疫技术培训，特别要组织做好村居动物防疫员的免疫技术培训。在实施免疫时要规范操作，按要求更换注射针头，做好各项消毒工作，防止在免疫操作中人为传播疫病。要加强疫苗的运输和保存管理，保证疫苗质量。（三）加强一线指导，规范免疫管理。继续推行“一线工作法”，切实加强对一线动物防疫工作的指导和服务。要进村入场入户加强对免疫工作的跟踪和督导。组建免疫专业队，开展“拉网式”集中免疫。要规范做好免疫信息记录、报送和免疫档案保管工作，及时反馈免疫过程中发现的问题。要切实加强对规模场强制免疫工作的监管。 四、疫苗监管 （一）强化疫苗供应管理。强制免疫疫苗由省农业厅依法进行统一招标采购，实行省—设区市—县（市、区）—乡（镇）—村（规模场）五级逐级发放制度，原则上不得越级发放。街道要进一步规范疫苗供应工作，建立健全疫苗供应记录档案；要对疫苗的保存、运输、使用等环节冷链体系运行情况进行监管，确保疫苗质量的稳定，防止疫苗浪费。严禁任何单位和个人倒买倒卖国家动物疫病强制免疫疫苗。 （二）规范疫苗自购行为。各村居要严格执行畜禽养殖场自购强制免疫疫苗的备案制度。养殖场自购强制免疫疫苗所需经费自行承担，疫苗只限于本养殖场内饲养的畜禽免疫用。各村居动物防疫员要加强对养殖场的疫苗采购和使用情况的监管，严禁养殖场以技术服务、推广、代销、代购、转让等名义进行变相销售或经营强制免疫疫苗的行为。 （三）及时处理好动物免疫应激反应。动物强制免疫出现应激反应的，要立即采取紧急救治措施，尽可能减少农户损失。出现大规模应激反应的，应在12小时内报至延平区动物疫病预防控制中心。对因强制免疫应激死亡的畜禽，畜牧兽医站要按规定及时派员到现场进行认定，严格执行接到报告后12小时内认定和分级认定规定，并规范做好认定记录和补偿经费申请工作。 五、监督检查 （一）落实免疫责任。针对免疫工作，逐个环节细化责任，层层落实到人。对因免疫不到位引发动物疫情的，要严肃追究相关人员责任。对不履行强制免疫职责的单位和个人，要依法追究其责任。（二）加强免疫效果检查。街道要按照《动物强制免疫质量提升行动计划》的要求，切实加强免疫效果监测，定期组织免疫效果自查与评价工作，对被抽检的场、公司，村居存栏家畜（禽）群体抗体合格率未达到规定要求的，尽快进行补免。（三）加强动物卫生监管。畜牧兽医站出具检疫证明时，应严格核查调运畜禽的免疫情况，对调出县境的种畜禽或其他非屠宰畜禽，在调运前2周进行一次加强免疫，对调运的种蛋和未达首免日龄的仔畜、雏禽，应标明其供体的免疫情况，未加强免疫或免疫情况不明的禁止调运。（四）加大督促检查力度。各村居要及时掌握本辖区的免疫工作进展，加大自查指导力度，定期对强制免疫计划落实情况进行督促检查，并对检查结果进行通报，确保免疫工作落实到位。（五）强化绩效考核。要进一步加强重大动物疫病防控延伸绩效管理，健全防控奖惩机制，落实防控工作责任，推进强制免疫工作落实到位。（六）做好免疫失败的处理。街道对辖区内免疫抗体水平不达标情况和动物强制免疫失败情况进行调查处理，认真分析原因，及时改进，并将有关情况及时报延平区动物疫病预防控制中心。 六、其他 （一）各村居在做好动物疫病强制免疫工作的同时，要统筹做好新城疫、狂犬病、猪流行性乙型脑炎等其他动物疫病的免疫工作。 （二）若国家、省、市、区动物强制免疫政策发生变动，街道将根据国家、省、市、区的要求和水南实际，另行调整本计划。 附件：1.高致病性禽流感免疫方案 2.口蹄疫免疫方案 3.高致病性猪蓝耳病免疫方案 4.猪瘟免疫方案
哈哈~我们刚考到这题
原理：
B淋巴细胞在抗原的刺激下，能够分化、增殖形成具有针对这种抗原分泌特异性抗体的能力。B细胞的这种能力和量是有限的，不可能持续分化增殖下去，因此产生免疫球蛋白的能力也是极其微小的。将这种B细胞与非分泌型的骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，再进一步克隆化，这种克隆化的杂交瘤细胞是既具有瘤的无限生长的能力，又具有产生特异性抗体的B淋巴细胞的能力，将这种克隆化的杂交瘤细胞进行培养或注入小鼠体内即可获得大量的高效价、单一的特异性抗体。这种技术即称为单克隆抗体技术。
过程
1）免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多采用纯系 Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备，也可采用脾内直接免疫法。
2）骨髓瘤细胞的培养与筛选 在融合前，骨髓瘤细胞应经过含8-AG的培养基筛选，防止细胞发生突变恢复HGPRT的活性（恢复HGPRT的活性的细胞不能在含8-AG的培养基中存活）。骨髓瘤细胞用10%小牛血清的培养液在细胞培养瓶中培养，融合前24h换液一次，使骨髓瘤细胞处于对数生长期。
3）细胞融合的关键:
1技术上的误差常常导致融合的失败。例如，供者淋巴细胞没有查到免疫应答。这必然要失败的。
2融合试验最大的失败原因是污染，融合成功的关键是提供一个干净的环境，以及适宜的无菌操作技术。
4）阳性克隆的筛选 应尽早进行。通常在融合后10天作第一次检测，过早容易出现假阳性。检测方法应灵敏、准确、而且简便快速。具体应用的方法应根据抗原的性质，以及所需单克隆抗体的功能进行选择。常用的方法有 RIA法、 ELISA法和免疫荧光法等。其中ELISA法最简便，RIA法最准确。阳性克隆的筛选应进行多次，均阳性时才确定为阳性克隆进行扩增。
5）克隆化 克隆化的目的是为了获得单一细胞系的群体。克隆化应尽早进行并反复筛选。这是因为初期的杂交瘤细胞是不稳定的，有丢失染色体的倾向。反复克隆化后可获得稳定的杂交瘤细胞株。克隆化的方法很多，而最常用的是有限稀释法。
（1）显微操作法：在显微镜下取单细胞，然后进行单细胞培养。这种方法操作复杂，效率低，故不常用。
（2）有限稀释法：将对数生长期的杂交瘤细胞用培养液作一定的稀释后，按每孔1个细胞接种在培养皿中，细胞增值后成为单克隆细胞系。第一次克隆化时加一定量的饲养细胞。由于第一次克隆化生长的细胞不能保证单克隆化，所以为获得稳定的单克隆细胞株需经2～3次的再克隆才成。应该注意的是，每次克隆化过程中所有有意义的细胞都应冷冻保存，以便重复检查，避免丢失有意义的细胞。
（3）软琼脂法：将杂交瘤细胞稀释到一定密度，然后与琼脂混悬。在琼脂中的细胞不能自由移动，彼此互不相混，从而达到单细胞培养的目的。但此法不如有限稀释法好。
（4）荧光激光细胞分类法：用抗原包被的荧光乳胶微球标记杂交瘤细胞，然后根据抗原与杂交瘤细胞结合的特异性选出细胞，并进行单细胞培养。
6）细胞的冻存与复苏
7）大规模单克隆抗体的制备 选出的阳性细胞株应及早进行抗体制备，因为融合细胞随培养时间延长，发生污染、染包体丢失和细胞死亡的机率增加。抗体制备有两种方法。一是增量培养法，即将杂交瘤细胞在体外培养，在培养液中分离单克隆抗体。该法需用特殊的仪器设备，一般应用无血清培养基，以利于单克隆抗体的浓缩和纯化。最普遍采用的是小鼠腹腔接种法。选用BALB/c小鼠或其亲代小鼠，先用降植烷或液体石蜡行小鼠腹腔注射，一周后将杂交瘤细胞接种到小鼠腹腔中去。通常在接种一周后即有明显的腹水产生，每只小鼠可收集5～10ml的腹水，有时甚至超过40ml。该法制备的腹水抗体含量高，每毫升可达数毫克甚至数十毫克水平。此外，腹水中的杂蛋白也较少，便于抗体的纯化。
意义：
用于以下各种生命科学实验并具有医用价值
（1）沉淀反应：Precipitation reaction
（2）凝集实验：haemaglutination
（3）放射免疫学方法检测免疫复合物
（4） 流式细胞仪：用于细胞的分型和细胞分离。
（5）ELISA 等免疫学检测
（6）BIAcore biosensor:检测Ab-Ag或与蛋白的
亲和力 。
(7) 免疫印记（western blotting)
（8） 免疫沉淀：
（9） 亲和层析：分离蛋白质
（10） 磁珠分离细胞
（11）临床疾病的诊断和治疗；
