脱毒苗有以下三种方法。
1. 热处理脱毒 热处理脱毒的基本原理是在稍高于正常温度的条件下,使植物组织中的病毒可以被部分地或完全地钝化,而较少伤害甚至不伤害植物组织,实现脱除病毒。热处理可以通过热水浸泡或湿热空气处理。热水浸泡对休眠芽效果好,湿热空气处理对活跃生长的茎尖效果较好,且容易进行,既可以杀灭病毒又可以使寄主植物有较高的存活机会。热处理的温度和时间,随着植物病毒种类的不同差别较大,一般热处理温度在37~50℃之间,可以恒温处理,也可以变温处理。热处理时间由几分钟到数月不等。
②恒热处理法。先准备好盆栽一年生杜梨砧木苗,春季取待脱毒的梨品种接穗切接于盆栽的杜梨砧木上,第二年2月中旬将盆栽苗移于温室,待萌动后,防入热处理箱内,将温度控制在37±1℃,处理28~30天。
②变温热处理法。在32℃和38℃两个变换温度下,每隔8小时换1次,处理6天。
将上述两种热处理以后的芽,劈接或皮下接于盆栽的杜梨实生苗上,套上塑料袋保湿,待成活后移入田间鉴定。
2. 茎尖培养法 病毒在植物体内是靠筛管组织进行转移或通过胞间连丝传给其他细胞的。因此,病毒在植物体内的传播扩散也受到一定的限制,造成植物体内部分细胞组织不带病毒,同时植物分生组织的细胞生长速度又快于体内病毒的繁殖转移速度。因此,根据这一原理,利用茎尖培养可以获得无病毒种苗。茎尖培养脱毒时,切取茎尖的大小很关键,一般切取0.10~0.15mm的带有1~2个叶原基的茎尖作为繁殖材料较为理想,超过0.5mm时,脱毒效果差。
选好栽培品种适宜的培养基后,从待脱毒接穗上,取0.1~0.3mm的茎尖,接种在准备好的培养基上,待无根苗长到2㎝高时,准备脱毒鉴定。
3. 茎尖培养与热处理相结合脱毒法 为了提高茎尖脱毒效果,可以先进行热处理,再进行茎尖培养脱毒。通过茎尖培养法培养出无根苗后,放入温度在37±1℃条件下,处理28天,再切取0.5mm左右的茎尖进行培养;或者先进行热处理后,取0.5mm的茎尖进行培养,然后进行病毒鉴定。
上述三种方法脱毒处理后的苗木,均应进行病毒鉴定。无病毒苗木是经过脱毒培育的树种。其树势强健,早实性、丰产性均强 无病毒果树的生长量较常规树高出约1/3左右,增产约16%~60%。树势强健,骨干枝牢固,结果枝分布均匀,产量提高约20%~30%,果园整齐度高,增产潜力大而稳定。