微生物的培养方法有三种，即纯培养法、选择性培养法和优势培养法。
一、 菌种制作的基本设备
1、 食用菌菌种制作的工艺流程 培养料的贮备和预处理------- 容器、工具的洗涤------ 配料、培养基制作------ 灭菌------ 冷却------ 接种------ 培养------- 贮存 2、 基本设施 ① 厂房：② 原料库③原料预处理场地④ 洗涤室：5配料室⑥ 灭菌室⑦ 接种室⑧ 化验室 ⑨ 培养室⑩贮存室 二、 纯种分离 菌种的分离方法主要有：孢子分离法、组织分离法、基内菌丝分离法和土中菌丝分离法。
1、 孢子分离法：属有性繁殖。对于香菇、平菇异宗结合的菇类，为避免产生单孢不孕现象，必须采用多孢分离法。单孢分离法主要用于杂交育种的研究。
⑴ 种菇的选择和处理 种菇选择的标准：必须纯正，具有本菌株性状，发育健壮，无病虫害，成熟度适当。种菇选定后，首先除去附着在菇体表面的杂物，如蘑菇、草菇可用0.1%升汞浸泡消毒2-3分钟，然后用无菌水漂洗3次，以洗除表面附着的药物，最后用无菌纱布吸干水分。香菇、平菇可用75%酒精进行表面消毒。
（2）多孢分离法 ① 整菇播种法② 钩悬法③ 贴附法 4菌褶上抹取孢子法⑤ 孢子印分离法 ⑥ 空中孢子捕捉法
（3）单孢子分离法 一般采用方法：平板稀释法、连续稀释法、毛细管法等。
2、 组织分离法
（1） 子实体分离法
（2）菌核分离法
（3）菌索分离法：对一些不易找到子实体及菌核的菌类
3、基内菌丝分离法 对于子实体只有在特定的季节下出现，平时不易采到，或子实体小而薄或呈胶质状态
（1）菇木（或耳木）分离法 在食用菌繁殖旺盛期
（2） 代料基质分离法 分离前，选择一批子实体发生早、产量高、菇体尚幼嫩且生活力强而无病虫害的栽培袋，待子实体将近成熟时，去掉子实体，然后用75%酒精将培养袋进行消毒后，在培养料下1.5cm处挑取0.3cm的培养料小方块组织，接入试管培养基的中央，置于恒温下培养。
3、 土中菌丝分离法： 用于采集生长在土中的菇类菌丝体
三、制种技术 采用孢子分离、组织分离和基内菌丝分离等方法分离培养而获得的纯菌丝，经过原种的扩大培养和母种、栽培种的制作，即可作为食用菌生产用的菌种。
1、 菌种的类型 母种、原种、生产种
2、 培养基的种类 天然培养基、合成培养基、半合成培养基
3、 原种制作 从担孢子或菇体组织直接分离培养获得的原种或引进的原种
4、 母种及生产种制作 将原种菌丝体移植到由粪、草、木屑、棉籽壳或麦粒等原料配制成的培养基上，而制成的菌种称母种。将母种再扩大繁殖制成的菌种，称栽培种或生产种。
5、 培养基灭菌
（1）高压蒸汽灭菌法 琼脂培养基采用1.05kg/cm2 压力，温度121℃ ，灭菌45-60分钟；母种和栽培种固体培养基采用1.2-1.5kg/cm2 压力，温度123-129℃ ，灭菌1-1.5 小时。 （2） 常压蒸汽灭菌
6、 接种室消毒灭菌 熏蒸消毒法：甲醛与高锰酸钾混合熏蒸法
（2）紫外线消毒：（3）石碳
酸灭菌
7、 接种 在无菌条件下，将原种或母种菌种移接到经过严格灭菌的培养基上，称为接种。 8、 菌种培养
四、菌种保藏方法及复壮技术
1、 菌种保藏方法 菌种保藏的基本手段是采用低温、冷冻、干燥、减少供氧量等方法，终止其繁殖，降低其代谢强度，使之处于休眠状态。
培养料配方。⑴稻草、菜饼、尿素、菇乐素、过磷酸钙、石灰.培养料采用二次发酵法，在室外堆制15天左右，其间翻堆3—4次，然后进菇房或菇棚，加温至65℃左右保持6—8小时，后降温至52℃保持3天，进行后发酵。
二、播种及发菌期管理。采用二次撒播法。即先把菌种量的2/3撒于料面，然后将菌种翻入料内，再把余下的1/3菌种撒在料层表面，用木板轻轻拍平。播种量为每平方米用麦粒种2瓶或棉壳种3瓶。播种后以紧窗发菌为主，温度高时适当通风。
三、覆土。当菌丝基本长到料层底部时进行覆土，覆土材料用细泥、砻糠灰或河泥、砻糠灰，龙糠灰与泥土的比例为20:1，用前喷甲醛消毒，水分掌握在捏得拢、撒得开，pH值为8左右。覆土厚度3—4厘米，每平方米喷清水2.25公斤，紧窗，土层缝隙里有菌丝冒出时补土。
四、出菇管理。覆土后约15天，菌丝开始扭结成原基，这时进行通风、喷水，使床面始终保持湿润状态，同时菇房（菇棚）内保持较高的空气湿度，达到85%—90%。
五、病虫害控制。一潮菇结束后，用敌杀死4毫升加水25公斤喷打床面，同时加大通风量，使水分不淤积于菇体而造成色变、烂斑。
如何种植蘑菇 一、培养料配方。⑴稻草、菜饼、尿素、菇乐素、过磷酸钙、石灰.培养料采用二次发酵法，在室外堆制15天左右，其间翻堆3—4次，然后进菇房或菇棚，加温至65℃左右保持6—8小时，后降温至52℃保持3天，进行后发酵。 二、播种及发菌期管理。采用二次撒播法。即先把菌种量的2/3撒于料面，然后将菌种翻入料内，再把余下的1/3菌种撒在料层表面，用木板轻轻拍平。播种量为每平方米用麦粒种2瓶或棉壳种3瓶。播种后以紧窗发菌为主，温度高时适当通风。 三、覆土。当菌丝基本长到料层底部时进行覆土，覆土材料用细泥、砻糠灰或河泥、砻糠灰，龙糠灰与泥土的比例为20:1，用前喷甲醛消毒，水分掌握在捏得拢、撒得开，pH值为8左右。覆土厚度3—4厘米，每平方米喷清水2.25公斤，紧窗，土层缝隙里有菌丝冒出时补土。 四、出菇管理。覆土后约15天，菌丝开始扭结成原基，这时进行通风、喷水，使床面始终保持湿润状态，同时菇房（菇棚）内保持较高的空气湿度，达到85%—90%。 五、病虫害控制。一潮菇结束后，用敌杀死4毫升加水25公斤喷打床面，同时加大通风量，使水分不淤积于菇体而造成色变、烂斑。 现在由于食用菌种植的经济效益较好，从事生产的农户越来越多。究竟怎样才能种植好食用菌，记者采访了有关农业专家。 食用菌是知识密集和劳动密集相结合的产业，是三分栽培七分管理，要用科学的态度来指导发展食用菌，没有成熟、过硬的技术，想达到理想的经济效益肯定不行。那么，怎样才能提高食用菌的经济效益，降低市场风险，一是选择营养价值高、无霉烂的原料作为栽培食用菌的营养料。二是适时栽培。如果夏季栽培秋冬季品种肯定不行，冬季栽培夏季品种同样不行，迟栽也不行。三是选择优质、高产的菌种。俗话说“好种出好苗”，没有好的菌种就达不到好的产量。四是提高产品质量。做到适时采摘。食用菌生长分为前期、中期、后期三个时期，后期大量的孢子已经分生、老化，重量和品质都会下降。据了解，市场上最常见的平菇，大部分采收都在后期，同时有些从事食用菌销售的商贩还加些水，但消费者对此不清楚，买回去后烹饪，出现大量的水，一点鲜味也没有，逐渐地消费者对这种产品就不再购买。还要注意增加室内通风和湿度，创造适合食用菌生长的环境。 发展一个产品要了解和掌握其市场信息，不能凭空想象。要了解市场上哪一种品种今年会走俏，哪一种品种适合在当地销售，投入有多大、产生的效益如何、技术能不能接受等。靠“自产自销”的思路来发展食用菌是不行的，可以考虑找一家有实力、技术过硬、信誉度好、可靠的单位与其联手或签约合同，生产出来的产品由单位来销售。必须采取公司加基地带农户的发展方式来发展食用菌，由公司提供技术、新品种和市场，通过基地来生产，跟销售方签订合同，带动农民一家一户生产，才能把食用菌生产风险降到最低 如何用牛粪种植蘑菇，及如何发酵，及如何选种子？ 答：双孢蘑菇牛粪、锯末堆料发酵制种 传统的双孢菇制种技术成本高，成功率偏低，菌丝不易长到瓶底，水分不易控制，菌种易老化2000年夏季，我们采用了牛粪、锯末堆料发酵技术进行双孢菇制种，制母种的成功率达99．9％，制原种的成功率达98．1％．制栽培种的成功率93．2％。 制种方法如下： 牛粪、锯末的发酵 选未变质的锯末，过筛后在阳光下暴晒2～3天。晒时要摊匀、晒透。然后贮存备用。将牛粪晒干、打碎后备用。另外，备足碳酸氢铵、磷酸二氢钾、生石灰、轻质碳酸钙等辅料。将牛粪、锯末，按体积比1：1的比例混合。同时，加入牛粪和锯末总重量0．3％的碳酸氢铵、2％的磷酸二氢钾、约2％的生石灰（生石灰的加入量，根据其质量而定，要求混合均匀后，pH值为7．5～8）、2％的轻质碳酸钙。混合均匀后加水，使水分含量达68％～70％。然后建高1米、宽1．2米，长度不限的料堆。建好堆后插入温度计。当温度上升到75℃左右时进行第一次翻堆（时间约为10 天）。每次翻堆前，给料堆表面喷少量的石灰水，在发酵过程中，若发现料堆的中下部有变黑的趋势，可用木棍适当打孔通气。一般翻堆4～5次，时间间隔为10、9、8、7天。若时间来不及，可翻堆3次。发酵完后晒干备用， 发酵过程中容易出现的问题与处理办法： （1）料堆不升温或升温缓慢。锯末发酵不如秸秆升温快，若发现升温较慢，可适当加入碳酸氢铵，调节碳氮比，促其升温。若温度能升到60℃以上，则不必调节。 （2）料堆中下部变成黑褐色，有异味。这种现象是由缺氧引起的，原因是料堆堆得过大或过实，应抓紧翻堆，翻堆后打孔通气。 配制培养基 将麦粒煮透后，加入麦粒体积1／4左右的锯末发酵料，然后加人生石灰，将pH值调至7．5～8。按干麦粒的重量，加人1％～2％的轻质碳酸钙，拌匀后装瓶。锯末料必须细碎，不能有大块，防止因块内干心而导致灭菌不彻底装瓶时要将料充分混合。装瓶时瓶子要放正，不能过度倾斜。否则，装瓶后麦粒偏向一侧，锯末偏向一侧，装料后接入菌种。
